Huidige Locatie: Home -  Michael Kors Shop Belgium synthetische genen ingeschakeld waardoor dit een

Michael Kors Shop Belgium synthetische genen ingeschakeld waardoor dit een

Michael Kors Shop Belgium

De efficiëntie van heterologe eiwitproductie in Escherichia coli (E. coli) kan worden verminderd door vooringenomen codongebruik. Benaderingen normaal gebruikt om dit probleem te overwinnen omvatten gerichte mutagenese zeldzame codons of de toevoeging van zeldzame codon tRNA in bepaalde cellijnen te verwijderen. Onlangs hebben verbeteringen in de technologie kosteneffectieve productie van synthetische genen ingeschakeld, waardoor dit een haalbaar alternatief. Om deze optie te onderzoeken, werden de expressie patronen in E. coli van 30 menselijke korte-keten dehydrogenase / reductase genen (SDR's) geanalyseerd in drie onafhankelijke experimenten, de inheemse en synthetische (-codon geoptimaliseerd) Michael Kors Shop Belgium versies van elk gen te vergelijken. De constructen werden bereid in een pET-afgeleide vector die een N-terminale polyhistidine tag om het eiwit voegt; expressie werd geïnduceerd met IPTG en oplosbare proteïnen werden geïsoleerd door Ni-NTA metaal-affiniteitschromatografie. Expressie van de natieve en synthetische gen constructen werd vergeleken in twee isogene bacteriële stammen, waarvan één bevatte een plasmide (pRARE2) dat zeven tRNAs herkennen zeldzame codons draagt. Hoewel we vonden enige mate van variabiliteit tussen experimenten in normale E. coli synthetische genen kunnen tot expressie worden gebracht en gezuiverd gemakkelijker dan de oorspronkelijke versie. In een enkel geval Michael Kors Outlet Tassen is inheems genexpressie beter. Belangrijk is dat in de meeste maar niet alle gevallen de expressie van de natieve genen in combinatie met zeldzame codon tRNAs nagebootst het gedrag van de synthetische genen in de natieve stam. De trend is dat heterologe expressie van sommige eiwitten in bacteriën kan worden verbeterd door het veranderen van codonvoorkeur, maar dat dit effect in het algemeen kan worden geïncorporeerd door het introduceren zeldzame codon tRNAs in de gastheercel.
0 Reacties


Spreek uw mening
Recente Reacties